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酶制剂
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常被用于降解蛋白生产短肽
蛋白酶K简介
蛋白酶K是一种重要的丝氨酸蛋白酶，由林伯氏白色念球菌分泌。1974年,Wolfgang Ebeling等利用沉淀、离子交换层析和凝聚层析等方法在林伯氏白色念球菌的培养基中分离纯化出蛋白酶K。蛋白酶K属于枯草菌素家族。具有很高的酶活性和广泛的底物特异性，常被用于降解蛋白生产短肽。它具有丝氨酸蛋白酶类所特有的典型催化三联体 Asp39-His69-Ser224特征并且活性中心周围有两个Ca2+结合位点增加其稳定性，使其在更广泛的条件下保持较高的酶活力。
蛋白酶K的技术指标
【外观】白色无定形冻干粉末
【比活性】≥30 U/mg 蛋白
【脱氧核糖核酸酶活性】未检测到脱氧核糖核酸酶活性
【核糖核酸酶活性】未检测到核糖核酸酶活性
蛋白酶K的酶学性质
【来源】林伯氏白色念球菌(Tritirachium album)
【分类】EC 3.4.21.64
【分子量】29 kDa (SDS-PAGE)
【等电点】7.81
【pH】7.0-12.0 都具有较高活性
【温度】65 ℃
【pH 稳定性】pH 4.5-12.5 (25 ℃, 16 h)
【热稳定性】50 ℃以下稳定(pH 8.0, 30min)
【激活剂】SDS, 尿素
【抑制剂】二异丙基氟磷酸(DFIP),苯甲磺酰氟(PMSF)
【储存条件】干粉状态可在-20 ℃长期储存;溶解后应分装为适当体积,2-8 ℃短期储存,-20 ℃长期贮存
蛋白酶K的应用
1.在核酸提取检测中的应用:蛋白酶K可降解与核酸紧密结合的组蛋白,将DNA与蛋白质的分离,使得DNA被提纯;而且蛋白酶K可降解RNA水解酶活性(Rnase),抑制Rnase水解模板RNA,在RNA的提取和检测过程中起到不可或缺的作用。
2.在原位杂交中的应用:蛋白酶K通常用来消化靶标DNA周围的蛋白质,以便于检测探针的穿透,提高检测的敏感性。需注意的是:蛋白酶K浓度过高或消化时间过长,都会破坏细胞结构,出现细胞核消失及脱片等现象,影响核酸的结合。
3.在非蛋白组分提取中的应用:蛋白酶K可降解蛋白质类杂质,将目标组分和来自生物样本中的蛋白质进行分离,提高产物的纯度和生产效率,尤其可以降解内毒素等蛋白质类有害成分。
蛋白酶K的生产
公海710官网客服通过生物信息学分析、分子改造等技术手段成功筛选到一株具有较高有机溶剂耐受性的蛋白酶K突变体;构建了高产蛋白酶K的毕赤酵母工程菌株,优化工程菌发酵、酶纯化、产品后处理和冻干等工艺,提升蛋白酶K的生产效率,实现了蛋白酶K千克级生产,已成为国内靠谱的蛋白酶K生产商。通过酶定向改造技术与工艺优化,公海710官网客服科技蛋白酶K对于异硫氰酸胍溶液的耐受性明显提升。
公海710官网客服科技立志成为特种酶产品与服务商,像蛋白酶K这样的高难度产品,要做到产品质量与产量都满足客户需求,目标就是为“新型冠状病毒”检测试剂盒的china制造打上我们自主核心原料供应商的烙印。公海710官网客服会继续努力,为提升china体外诊断原料在供应链中的话语权而继续奋斗!
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【较高的酶活力】公海710官网客服的酶制剂比活力高，并且针对酶活力的定制要求也是可以满足的。对催化反应体系的稳定至关重要。
【良好的热稳定性】公海710官网客服生产的酶制剂更经得起环境温度变化的折腾，在效期、运输等方面都具有更明显的优势。
【宽范围的pH稳定性】公海710官网客服生产研发的酶制剂在较宽的pH范围内都能够保持很高的活力，代表这种酶对不同pH的催化反应体系拥有良好的兼容性，是值得信赖的选择
【较强的抗干扰能力】通常反应力会掺杂一些杂志，会影响到反应的正常进行，公海710官网客服生产的酶制剂即使有干扰物质的出现，依旧表现良好，继续发挥着催发反应的核心作用
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